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关于进口化妆品洋葱伯克霍尔德菌的检验



录入时间:2020-1-10 14:59:58 来源:青岛海博生物

  洋葱伯克霍尔德菌(Burkholderia cepacia,BC)曾名为洋葱假单胞菌(Pseudomonas cepacia),因引起洋葱球茎腐烂而得名,1993年改为现名。

生物学特性:
  洋葱伯克霍尔德菌为革兰阴性杆菌,对营养要求不高,一般在普通培养基生长良好,最适合生长温度为30℃,在4℃不生长,42℃生长不定。

分布范围:
  洋葱伯克霍尔德菌存在于土及水中,在医院环境中常污染自来水体温计喷雾器、血管导管、导尿管、静脉输液器等,因而可多种医院内感染,包括败血症、心内膜炎、肺炎、伤口感染、脓肿、眼结膜炎等,是条件致病菌。其细胞膜的不通透性使其对大多数抗生素产生耐药,在医院易引起暴发流行,是医院感染的重要病原菌之一。

检验流程:
  根据SN/T4684-2016进出口化妆品洋葱伯克霍尔德菌检验方法规定,检验流程如下:

典型菌落特征:
  含多粘菌素B、庆大霉素的BCSA琼脂:红色圆形菌落,表面光滑,周围培养基变红
  含多粘菌素B、庆大霉素的麦康凯琼脂:浅黄褐色圆形菌落,表面光滑,周围培养基不变色

生化鉴定:
葡萄糖氧化实验:
  挑取可疑菌落,接种于2 支葡萄糖发酵管,其中一支加灭菌液体石蜡封口,另一支不封口,36℃土1℃,24h。二者均变黄为葡萄糖发酵型,未加石蜡管变黄而加石蜡管不变色为葡萄糖氧化型。
选择葡萄糖氧化型,在营养琼脂平板上划线纯化培养,36℃士1℃,24 h。纯培养养物继续进行鉴定。
革兰氏染色:
  挑取可疑菌落涂片,进行革兰氏染色。显微镜镜下观察,洋葱伯克霍尔德菌为革兰氏阴性无芽孢杆菌。
氧化酶试验:
  用玻璃棒或一次性接种针挑取单个特征性菌落,涂布在氧化酶试剂湿润的滤纸平板上。洋葱伯克霍尔德菌为迟缓型氧化酶阳性(紫红色、紫色、或深蓝色),反应时间约为2min - 10min
注:实验中切勿使用镍/铬材料
过氧化氢酶实验:
  用玻璃棒或一次性接种针挑取单个特征性菌落,置于洁净室管内,滴加3%过氧化氢溶液(临用时配置)2ml,观察气泡产生情况。洋葱伯克霍尔德菌为迟缓产气,1s后出现气泡。
蔗糖氧化实验:
  挑取可疑菌落接种于蔗糖氧化培养基上,36℃±1℃,24h。培养基变黄色为阳性,蓝色为阴性。洋葱伯克霍尔德菌为阳性反应。
枸橼酸盐利用:
  挑取可疑菌落接种于西蒙氏枸橼酸盐培养基,36℃±1℃培养24h,培养基变蓝色为阳性,浅绿色为阴性。洋葱伯克霍尔德菌为阳性反应。
七叶苷利用:
  挑取可疑菌落接种于七叶苷培养基,30℃士1℃培养 24 h ,培养基变黑色为阳性,不变色为阴性。洋葱伯克霍尔德菌为阳性反应。

葡萄糖

革兰氏染色

氧化酶

过氧化氢酶

蔗糖

枸橼酸盐

七叶苷

氧化型

阴性

迟缓型氧化酶阳性

阳性

阳性

阳性

阳性

 

进口化妆品洋葱伯克霍尔德菌检验用培养基(SN/T4684-2016)

用途 货号 名称 规格
增菌 HB5181-4 含多粘菌素B的SCDLP液体培养基 250g
添加剂 HB4131a 多粘菌素B  2.5万单位/支*5
增菌 HB9118 含庆大霉素的BCSA增菌液 250g
添加剂 HB9118a 庆大霉素溶液 1mg/支*5
分离 HB9119 含多粘菌素B、庆大霉素的BCSA琼脂 250g
添加剂 HB4131a 多粘菌素B  2.5万单位/支*5
添加剂 待定 庆大霉素溶液 1mg/支*5
分离 HB9120 含多粘菌素B\庆大霉素的麦康凯琼脂 250g
添加剂 HB4131a 多粘菌素B  2.5万单位/支*5
添加剂 HB9118a 庆大霉素溶液 1mg/支*5
生化 HB8650 3%过氧化氢酶 20支
HB2100 氧化酶试纸 10片
SN094 葡萄糖氧化/发酵管 20支
SN093 蔗糖氧化生化管 20支
GS011 西蒙氏枸橼酸盐 20支
GS021 七叶苷 20支

 

 

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